流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是：①测量速度快，最快可在ls内计测数万个细胞；②可进行多参数测量，可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量，并具有明显的统计学意义；③是一门综合性的高科技方法，它综合了激光技术，计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等从多领域的知识和成果；④既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。
概要说来，流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术，以及数据的采集和分析技术等。
1．操作步骤
（1）样品的制备制备单个细胞悬液方法如下。
①悬浮牛长细胞：离心后弃上清，PBS洗一次，用新鲜培养基稀释成1×10 6（6上标）～2×10 6（6上标）／ml的细胞悬液备用；
②单层培养细胞：采用酶消化法分散细胞，制备细胞悬液；
③实体组织：可采用机械法、化学法及酶消化法分散组织细胞。
（2）样品固定
①甲醛法：取适量单个细胞悬液，加等量8％甲醛－PBS，4℃下固定12～18h。
②乙醇法：将单个细胞悬液离心，弃上清，重新悬浮于5ml 4℃预冷的PBS中，缓慢加入－20℃预冷的95％乙醇15mI，使其终浓度为70％，冰浴30min。
③丙酮法：细胞悬浮于生理氯化钠溶液中，慢慢加入冷丙酮，使其终浓度为85％。
（3）样品染色和检测
①活细胞荧光染色：常用碘化丙啶（PI）。PI为核酸嵌入型染料，可嵌入双股螺旋结构中，故DNA和RNA均可染色。PI不能穿过活细胞胞膜，故活细胞拒染；但能穿过死细胞膜，使之着色。PI鉴别细胞死活的灵敏度很高，因此，在流式细胞术中常用PI测定细胞活力
②DNA显示法：标记DNA的荧光色素有很多，其中与DNA螺旋结构高度特异性结合的染料有普卡霉素（光辉霉素，MI）等抗生素，它不与RNA结合，而优先与G－C键结合。
③DNA和RNA双重染色：常用Hoechn 33258和哌咯宁Y（PY）。Hoechst33258为核酸特异性染料，与A－T键优先结合，在pH 2．0时优先与RNA结合，因此测定DNA需将溶液调至PH 7．O这种染料对死细胞可立即染色，而活细胞为渐进性着色，在10min内达到饱和。PY为RNA特异性染料。
④DNA与蛋白质双重染色
DNA与癌基因探针双标记测定：这种测定是先用癌基因探针按简介免疫荧光染色法标记癌基因表达产物，然后用PI标记DNA。
2．应用
（1）细胞生物学定量分析细胞周期并分选不同细胞周期时相的细胞；分析生物大分于如DNA、RNA、抗原等物质与细胞增殖周期的关系，进行染色体核型分析并可纯化x或Y染色体。
（2）肿瘤学DNA倍体含量测定是鉴别良、恶性肿瘤的特异性指标。
（3）免疫学研究细胞周期或DNA倍体与细胞表面受体及抗原表达的关系；进行免疫活性细胞的分型与纯化等。
（4）血液学血液细胞的分类；造血细胞的分化研究；血细胞中各种酶的定量分析等。
（5）药学检测药物在细胞中的分布，研究药物的作用机制，也可用于筛选新药。
