玻璃化现象是植物组织培养过程中特有的一种生理失调或生理病变，多数发生在植物茎尖培养和离体快繁中。玻璃苗生长繁殖速度下降，最后甚至死亡。和正常苗相比，玻璃苗矮小肿胀，节间很短或几乎没有，叶片水渍化，半透明，厚而狭长，皱缩或纵向卷曲，脆弱易碎，叶表缺少角质层，没有功能性气孔器。显微镜观察表明，玻璃苗叶片不具有栅栏组织，仅有海绵组织。玻璃苗细胞中含水量高，叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素等含量低。
在培养基MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.1mg/L的基础上，以6-BA、蔗糖、封口方式3个因素进行混合正交试验L6（2×32），选用经过3次继代后的正常无菌苗分别在4种培养基上继代培养。每个处理接种10瓶，每瓶接3个芽，重复3次。3周后统计增殖系数、玻璃化数。
地椒组培苗在培养基MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.1mg/L的继代增殖过程中我们发现，随着继代次数的增加，地椒组培苗的玻璃化程度也随之增加。为了有效防止地椒在继代过程中玻璃化的发生，我们分别设定不同浓度的6-BA、蔗糖以及不同的封口方式，结果表明：6-BA浓度、蔗糖浓度和不同的封口方式对地椒的玻璃化均有一定的影响，尤其以6-BA浓度对地椒玻璃化影响最为显着。随着6-BA浓度的降低，虽然增殖系数有所降低，但玻璃化现象明显改善，当6-BA浓度为0.1mg/L时，蔗糖浓度不低于4.5%，以透气的封口膜封口培养时，玻璃化现象彻底消除。
虽然植物组织培养过程中玻璃化现象的发生机理至今还没有得到很好的解释，但通过实验，人们已逐渐掌握了一些解决植物组织培养玻璃化现象的手段，目前常用的手段有：适当减少细胞分裂素；改善氧气供应状况和通气条件，控制温度；适当提高蔗糖浓度；适当降低培养基中NH浓度。玻璃化是百里香属植物组织培养中很难解决的问题，实验发现，随着继代次数的增加，玻璃化现象加深，这可能是由于细胞分裂素6-BA在地椒中富集到一定程度所造成的。因此，在复壮培养过程中，降低6-BA的浓度，适当提高蔗糖浓度，改变培养条件的透气性，能较好防止地椒玻璃化现象的发生。
【思考题】
1.试管苗发生玻璃化现象的特点是什么？
2.目前常用的解决和控制玻璃化现象的方法有哪些？
3.试管苗发生玻璃化现象的原因是什么？
