1.称出规定数量的琼脂，置于不锈钢锅中，加入蒸馏水直到培养基最终容积的3/4，在电磁炉上加热使之溶解。待琼脂溶解之后，加入规定数量的蔗糖，用玻璃棒搅拌均匀。若是要配制液体培养基，则不加琼脂，也无须加热，因为蔗糖在水中能溶解。
2.分别加入一定量的各种母液，包括生长调节物质和其他的特殊添加物。如果由于特殊原因有必要在高温灭菌之后再加入维生素和生长素，那么在调节了pH值之后，可使这些物质的溶液通过孔径为0.45μm的微孔滤器消毒。
3.加蒸馏水直到培养基的最终容积。
4.充分混合之后，用1.0mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸调节培养基的pH值。
pH值通常可采用精密pH试纸或酸度计进行测定。
（1）1.0mol/L氢氧化钠的配制方法是：称取氢氧化钠4.0g，溶解于100mL蒸馏水中。
（2）1.0mol/L盐酸的配制方法是：量取比重约为1.2的浓盐酸（12mol/L）8.4mL，加蒸馏水定容至100mL。
5.把培养基分装到所选用的培养容器中，每个150mL的三角瓶约装50mL。只有当培养基为均匀的液态时才能分装。
6.用封口膜或瓶盖封口。
7.把已装入了培养基的培养容器放入高压灭菌锅内锅。灭菌锅有各种不同的类型，在开始加热前必须注水至水位线，防止干烧。接通电源升温后，首先要排净锅内冷空气，然后在121℃（0.105MPa）下灭菌15min～20min。灭菌结束后，切断电源，让锅内气压自然下降，待压力表指针回零后，再打开放气阀，排出剩余蒸汽，打开锅盖取出培养基。过早开阀放气会造成锅内气压骤降，引起培养基沸腾外溢，须注意。
当用试管制备琼脂固化培养基时，最好把培养基做成斜面，这只要在冷却期间将试管斜置即可。斜面培养基可为组织的生长提供一个较大的表面积。
8.不同类型的培养基经过高温灭菌后应做好标记以免混淆，将灭菌后的培养基在室温下冷却后，置于接种室暂时保存。`
【思考题】
1.1.0mol/L氢氧化钠的配制方法是什么？
2.1.0mol/L盐酸的配制方法是什么？
3.简述MS及其他培养基的配制方法。
4.简述高压灭菌锅的使用方法及注意事项。
