一、材料的选择
选取生长健壮、无病虫害的葡萄母株为试验材料。
二、外植体的选择
带有饱满腋芽的半木质化茎段。
三、外植体的消毒
在田间选取带有饱满腋芽的半木质化茎段，饱和洗衣粉水刷洗表面（顺着腋芽生长方向刷洗）至表面无明显尘土，然后自来水下冲洗2h。在超净工作台上，将茎段剪成2cm左右的小段，保证每个茎段带有1个腋芽，然后放入广口瓶中，70%酒精消毒1min，再用0.1%氯化汞溶液消毒8min～10min，无菌水冲洗4次～5次后倒掉最后一次清洗用的无菌水，备用。
四、培养条件
1.诱导
在超净工作台上将消毒处理之后的外植体用无菌镊子从广口瓶中取出置于无菌滤纸上，让其吸干叶片上多余的水分，剪掉茎段两端褐化部分，然后将腋芽朝上接种在准备好的外植体诱导培养基中（1/2B5+IAA0.2mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值5.8～6.0）。用透气的封口膜封口培养。培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，继代周期30d。
2.继代生根
在诱导培养基上培养30d后，将长至2cm以上腋芽的将叶片转入继代培养基中（1/2B5+IAA0.2mg/L+活性炭0.1%+蔗糖3%+琼脂0.6%，pH值5.8～6.0）生根，如需增殖培养，可再生根培养25d，将试管苗剪成小段，每小段保证有1个顶芽或饱满的腋芽；如需进行试管苗移栽，则可在生根培养20d后进行。整个生根培养都必须是用透气的封口膜封口，培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，继代周期30d。
五、试管苗移栽
当株高长至3cm以上，根长为1cm以上时进行试管苗的移栽（大约生根培养20d）。首先，将试管苗连同培养瓶一起移至智能温室，炼苗1周。移栽前1d～2d，打开瓶盖，然后用镊子小心取出试管苗，洗净根部琼脂，用800倍代森锰锌溶液浸泡1min～2min，移栽于60穴盘中，其中基质成分为草炭∶蛭石∶珍珠岩=2∶1∶1，移栽后7d内保持温度25℃±2℃，湿度85%～90%，以后逐渐降低温度和湿度至智能温室内自然状态。移栽后10d在叶面喷施肥0.2%磷酸二氢钾，然后每7d交替喷施0.2%磷酸二氢钾和0.2%尿素。
【思考题】
1.葡萄组织培养过程中外植体取材的部位和标准是什么？
2.葡萄组培快繁的增殖类型是什么？
3.简述葡萄试管生根苗的移栽方法。
4.植物组培快繁有哪几种类型？
