一、材料选择
1.材料：已染病毒的马铃薯块茎。
2.培养基：
（1）茎尖培养：MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.8mg/L+GA30.1mg/L+蔗糖2%，pH值5.8～6.0
（2）生根培养：MS
二、方法和步骤
1.在正常的温度和光照条件下，在土中种1块单芽眼块茎，当芽长到约15cm高时，将顶梢切下6cm～8cm长，去掉下面的2个叶片，在切口处涂上生根激素，植入1个内装消毒土壤的花盆中，保持湿度60%～70%。
2.植入花盆3周～4周后，将其移入人工气候培养箱中，光照强度240μmol·m-2·s-1～320μmol·m-2·s-1，光照时间每天16h，白天温度36℃，夜间33℃。
3.2周后打掉幼株的茎尖，以促进腋芽的生长。
4.经过总共6周的热处理之后，折下1个腋生枝以从其上取芽，在植株上至少留下2个叶片以促其进一步生长。由折下的腋生枝上剪去叶片，但要把一小段基部叶柄留在枝上，把这个腋生枝包在滤纸内以防枯萎。
以下各项皆须在无菌条件下进行。
5.在40×体视显微镜下，把茎尖解剖出来。剥取茎尖的方法是：把残留的叶柄向后拉，使芽暴露出来，然后用1根解剖针剥掉芽上的幼叶。这项操作必须迅速，以免超净台的气流风干茎尖。
6.当只剩下2个最幼小的叶原基时，用1把锋利的解剖刀切下茎尖（300μm～500μm），直立向上接种到培养基上。
7.培养条件：温度23℃，每天光照16h，光照强度80μmol·m-2·s-1。在有些品种中，经过1周～2周培养后，茎尖即开始变绿、伸长、基部变粗，1个月后，茎伸长明显，原来的叶原基发育成小叶片。这时若把它们转入生根培养基中，就会逐渐长出根系，最后形成完整的小植株。
8.当茎长到3cm或更长并已生根时，即可移入土壤。起初要把植株保持在高湿度的环境中。
9.移入土壤后，立即对植株进行第一次病毒检测。
【思考题】
1.马铃薯脱毒的意义和必要性。
2.热处理脱除马铃薯病毒的主要环境指标是什么？
3.描述茎尖剥离的操作方法。
4.茎尖培养的培养环境、条件和培养基是什么？
