“实验目的”学会用玻片法测定ABO血型和交叉配血方法。为确保临床输血安全，输血前必须认真做好血型鉴定与交叉配血实验。
“实验原理”
ABO血型是根据红细胞膜上A、B凝集原的种类不同和有无将血液分为A型、B型、AB型和O型。该实验是用已知的抗A诊断血清和抗B诊断血清，分别与被鉴定者的红细胞混悬液相混合，红细胞膜上的抗原（凝集原）与血清中对应的抗体（凝集素）相遇时，会引起红细胞凝集，依其发生凝集反应的结果来判断被鉴定者红细胞膜上所含的凝集原类别来确定血型。由于ABO血型中有亚型存在，红细胞血型系统还有Rh血型，为了保证输血的安全，临床上在输血前，即使是同型输血，也必须进行常规的交叉配血实验。
“实验对象”人
“实验用品”抗A诊断血清、抗B诊断血清、双凹玻片、采血针、滴管、小试管、竹签、生理盐水、碘酒、75%酒精棉球、低倍显微镜、离心机、消毒注射器和针头。
“实验准备和步骤”
1.ABO血型的鉴定。
（1）取干净双凹玻片一张，用玻璃蜡笔在两端分别标明A、B字样。
（2）取已知的抗A、抗B诊断血清各1滴，分别滴加在玻片的A与B两侧，注意不可混淆。
（3）用75%酒精棉球消毒耳垂或指端，以消毒针刺破皮肤，滴1～2滴血于盛有lml生理盐水的小试管中混匀，制成红细胞悬液。
（4）
用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴在双凹玻片的抗A、抗B诊断血清中，用竹签使其充分混匀。放置10～15min后用肉眼或低倍显微镜观察有无凝集现象。如无凝集现象再用竹签混合，等30min后再根据有无凝集现象判定血型。
2.交叉配血实验
（1）
制取供血者和受血者的红细胞悬液和血清：用碘酒、75%酒精棉球消毒皮肤后，用消毒注射器抽取受血者1～2ml静脉血，取其1～2滴加入装有2ml生理盐水的小试管中制成红细胞悬液，其余的血液装入干净试管中待其凝固后，离心析出血清备用，用同样方法制备出供血者的红细胞悬液和血清。
（2）
交叉配血：取干净双凹玻片一张，分别注明“主”、“次”侧。在主侧各滴1滴供血者的红细胞和受血者的血清，在次侧各滴1滴受血者的红细胞和供血者的血清，然后分别用竹签混匀。放置10～15min后观察结果，如果两侧均无凝集现象，即可输血。
“注意事项”
1.采血针和采血必须严格消毒，以防感染。
2.制备红细胞悬液不能过浓或过稀，以免造成假凝集。
3.每人的滴管和竹签必须专用，搅动血清时切不可使抗A、抗B两种血清发生混合。
4.肉眼看不清凝集现象时，应在低倍显微镜下观察，注意区别红细胞叠连与红细胞凝集现象。
5.也可用血红蛋白吸管取血直接滴放于玻片上，A、B端各一滴，这样更安全。
“思考题”
1.ABO血型系统的分型依据是什么？
2.临床输血的原则是什么？为何同型输血前必须进行常规的交叉配血实验？
3.若无标准血清，已知某人血型为A型或B型，能否鉴定他人血型？怎样鉴定？
