脂质是组成人体组织的重要组成成分，为显示脂质，组织固定要注意：
（1）固定液中不能含有酒精、苯类、汽油和三氯甲烷等有机溶剂。
（2）一般脂质用中性缓冲福尔马林液固定即可。
（3）含磷脂组织用甲醛钙溶液为好（磷脂在一般中性缓冲福尔马林液时间较长时，容易溶掉，而在甲醛钙液中保存较好）。
一、冰冻切片油红O染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片，4～6微米。
3．试剂
100％丙二醇
0．5％油红O溶液
油红O00．5克
100％丙二醇100毫升
先加少量丙二醇到油红O中，充分搅拌后碾磨，然后逐渐加入其余的丙二醇，并不时地搅拌，缓慢加热溶液到95℃左右，决勿超过100℃。应边加热边搅拌，当温度降到40℃左右后用粗滤纸过滤，室温下过夜。玻璃滤器过滤（可加真空）。如果发现滤液变混浊，再过滤后使用。
85％丙二醇溶液
100％丙二醇85毫升
蒸馏水15毫升
Mayer氏苏木素溶液（见第4章）
甘油明胶
明胶10克
蒸馏水 60毫升
加热至明胶溶化后加入
甘油70毫升
苯酚1毫升
4．步骤
（1）将冰冻组织切片在蒸馏水中漂洗；
（2）放入纯丙二醇中2分钟；
（3）油红O液染色16小时；
（4）85％丙二醇液分化1分钟；
（5）蒸馏水漂洗2次（换水）；
（6）Mayer氏苏木素液染色15～60秒钟；
（7）蒸馏水彻底漂洗几次（每次换水）；
（8）用预热的甘油明胶封固。
5．结果
脂肪红色
细胞核蓝色
二、石蜡切片油红O染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，4～10微米。
3．试剂
100％丙二醇
0．5％油红O溶液（见前法）
85％丙二醇溶液
100％丙二醇 85毫升
蒸馏水 15毫升
Mayer氏苏木素溶液
甘油明胶（见前法）
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水洗；
（2）置入纯丙二醇溶液中3～5分钟；
（3）油红O液染色48～72小时；
（4）85％丙二醇溶液漂洗2分钟；
（5）Mayer氏苏木素溶液染色5分钟；
（6）流水彻底冲洗3分钟；
（7）蒸馏水漂洗2次（换水）；
（8）甘油明胶封固。
5．结果
脂质红色
细胞核淡蓝色
三、冰冻切片锇酸脂肪染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片，4～6微米。
3．试剂
1％锇酸
锇酸（安瓿） 1克
新鲜双蒸馏水 100毫升
锇酸有毒，应在通风橱内用锉刀在安瓿上划痕，将安瓿掷入蒸馏水中摇动震破安瓿，小心操作，避免吸入毒性气体，安瓿应事先洗去标签，用洗液浸泡12～24小时，再用双蒸馏水冲净。
甘油明胶（见前法）
4．步骤
（1）1％锇酸置于一能密封的染色缸内，放入切片后封盖，并放在通风橱内24小时；
（2）在蒸馏水内彻底漂洗几次，每次换水，共需6小时；
（3）选用合适的复染；
（4）蒸馏水洗；
（5）甘油明胶封固。
5．结果
脂肪 黑色
6．注意事项
背景染色可用伊红；细胞核可用核固红复染。
四、组织块锇酸染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．试剂1％锇酸（见前法）
3．步骤
（1）切取固定组织2～3毫米厚一小块；
（2）流水冲洗10分钟至数小时；
（3）蒸馏水漂洗2次（换水）；
（4）将组织浸入1％锇酸溶液内10～24小时；
（5）蒸馏水中充分洗涤几次（换水）；
（6）常规组织脱水，透明，浸蜡包埋；
（7）石蜡切片5～6微米，烤干；
（8）二甲苯透明；
（9）中性树脂封固。
4．结果
脂肪滴黑色
五、Baker氏酸性苏木素磷脂染色法
1．固定甲醛钙溶液。
2．切片冰冻切片6～12微米。
3．试剂
甲醛钙溶液
37％甲醛 10毫升
无水氯化钙1克
蒸馏水90毫升
重铬酸钾溶液
重铬酸钾5克
氯化钙1克
蒸馏水100毫升
明胶包埋剂？穴以25克明胶加入100毫升蒸馏水中加热到60℃搅拌？雪
酸性苏木素溶液
苏木素 0．1克
蒸馏水 98毫升
1％碘酸钠 2毫升
加热煮沸，冷却后再加入
冰醋酸2毫升
硼砂铁氰化钾溶液
铁氰化钾2．5克
四硼酸钠（晶体）2．5克
蒸馏水100毫升
4．步骤
（1）将新鲜组织在甲醛钙溶液中固定6小时；
（2）将组织块（不洗）移入重铬酸钾液中18小时；
（3）将组织块再转入另一份重铬酸钾液，在60℃温箱中24小时；
（4）自来水冲洗6小时；
（5）将组织块浸渍在明胶中过夜（37℃）；
（6）从温箱中取出明胶块，并放入4℃冰箱中硬固，修整组织块，切片前将组织块置于甲醛钙溶液中，室温下24小时（可更久）；
（7）自来水冲洗30分钟；
（8）冰冻切片6～12微米厚度；
（9）将切片置于重铬酸钾液60℃温箱中1小时；
（10）流水冲洗5分钟；
（11）蒸馏水中漂洗半分钟；
（12）切片置于酸性苏木素液中并在37℃温箱中过夜；
（13）用蒸馏水漂洗2次（换水）；
（14）硼砂铁氰化钾液中分化，37℃温箱中30～60分钟；
（15）流水冲洗5分钟；
（16）蒸馏水漂洗3次（每次换水）；
（17）贴片，沥干片刻，甘油明胶或阿拉伯胶封固。
5．结果
磷脂蓝黑色
背景棕色
中性缓冲福尔马林可溶解组织内磷脂，而甲醛钙液有保护磷脂之作用。
有时磷脂能够在中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋组织中显示出来，水化切片进行到1～4步，然后跳到9～17步。
六、Schultz氏胆固醇染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片6～10微米。
3．试剂
硫酸铁铵溶液（2．5％）
硫酸铁铵2．5克
蒸馏水100毫升
冰醋酸硫酸液
冰醋酸50毫升
浓硫酸50毫升
先将冰醋酸倒入烧杯中，周围用冰冷却。然后慢慢加入浓硫酸，并不停搅拌，用前临时制备。
4．步骤
（1）冰冻组织切片，入蒸馏水，洗干净载片贴片；
（2）吸干切片周围水分；
（3）在2．5％硫酸铁铵中处理3天；
（4）蒸馏水漂洗3次（每次换水）；
（5）吸干后再晾干；
（6）滴一滴新鲜配制的冰醋酸硫酸液在切片上，并立即用盖玻片盖上；
（7）立即在显微镜下观察；
冰醋酸硫酸液容易挥发，应在数分钟内观察完毕，如用凡士林或软石蜡等封固盖片四周，可延长观察时间。
5．结果
胆固醇蓝—绿色
七、中性脂肪与酸性脂肪区别染色法（尼罗蓝染色）
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片，6～10微米。
3．试剂
尼罗蓝（Nile blue）液A
尼罗蓝（Nile blue）1克
蒸馏水99毫升
混合搅拌均匀后静放备用（不要放入冰箱保存）。
如A液染色效果不佳，可改用B液。
尼罗蓝液B
尼罗蓝0．5克
蒸馏水99毫升
混匀后滴入
硫酸1毫升
混匀后在文火上煮沸1～2小时，冷却后过滤，煮沸蒸发后，溶液仅存60～70毫升。如用回流器煮沸？熏尼罗蓝可加至1～1．5克（溶液不能放入冰箱保存）。
4．步骤
（1）冰冻切片经蒸馏水漂洗；
（2）尼罗蓝液染色浸染（60℃温箱）10～15分钟；
（3）直接在60℃，l％冰醋酸水溶液中分化数秒钟；
（4）蒸馏水漂洗2次（换水）；
（5）滤纸吸干切片周围水分，待稍干；
（6）甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。
5．结果
中性脂肪红色
酸性脂肪蓝色
复合脂肪紫色
细胞核蓝色
八、苏丹Ⅲ染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片，6～10微米。
3．试剂
苏丹Ⅲ液
苏丹Ⅲ 0．15克
60％～70％酒精 100毫升
（亦可用60％～70％酒精和丙酮等量混合）
混合，临用前过滤。
Harris氏苏木素液（亦可用明矾苏木素液）
4．步骤
（1）冰冻切片经蒸馏水漂洗；
（2）Harris氏苏木素液（亦可用明矾苏木素液取代）浸染1分钟；
（3）水洗至返蓝（如核染色过深可用0．5％盐酸酒精分化再水洗返蓝）；
（4）蒸馏水漂洗2次（换水）；
（5）70％酒精快洗1次（20～30秒钟）；
（6）苏丹Ⅲ液浸染（于56℃温箱中）30分钟或更久；
（7）70％酒精分化数秒钟；
（8）流水洗去切片上浮色为止；
（9）蒸馏水漂洗1次；
（10）滤纸吸干切片周围水分，待稍干；
（11）甘油明胶或阿拉伯糖胶封固（短期内保存，久之褪色）。
5．结果
脂类物质橘红色
细胞核淡蓝色
九、苏丹Ⅳ染色法（猩红染色）
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片冰冻切片6～10微米。
3．试剂
苏丹Ⅳ染液
猩红2克
丙酮50毫升
70％酒精 50毫升
混合，充分溶解，用前过滤。
（亦可用60％磷酸三乙酯100毫升代替丙酮和酒精。配制时将溶液加热至100℃5分钟，边加热边搅拌，趁热用玻璃棉过滤，待冷却后再过滤1次。此液可长期保留，但用前须过滤。）
Harris氏苏木素液（或用明矾苏木素液代替）
4．步骤
（1）冰冻切片蒸馏水洗1次；
（2）Harris氏苏木素液染1分钟（亦可用明矾苏木素液）；
（3）水洗至返蓝。镜检，如细胞核着色过深，可用0．5％盐酸酒精分化，再水洗返蓝。
（4）蒸馏水洗1次；
（5）70％酒精快洗1次（20～30秒钟）。如用60％磷酸三乙酯配制苏丹Ⅳ者，本步改用60％磷酸三乙酯液快洗；
（6）苏丹Ⅳ液浸染，（于56℃温箱中）30分钟或更久；
（7）70％酒精分化数秒钟（或相应改用60％磷酸三乙酯分化，同第5步）；
（8）流水洗去上浮染料为止；
（9）蒸馏水洗1次；
（10）滤纸吸干切片四周水分，待稍干；
（11）甘油明胶封固。
5．结果
脂质猩红色
细胞核蓝色
十、Fischler氏醋酸铜脂肪坏死物染色法
1．固定10％甲醛钙溶液。
2．切片冰冻，6～10微米。
3．试剂
醋酸铜饱和水溶液
醋酸铜10克
蒸馏水100毫升
WeIgerl氏碳酸锂苏木素液
A液：
苏木素1克
无水酒精10毫升
B液：
碳酸锂饱和水溶液10毫升
蒸馏水90毫升
A、B液分别配制，用前临时混合。
Weigert氏硼砂—铁氰化钾液
铁氰化钾2．5克
硼砂2克
蒸馏水100毫升
4．步骤
（1）蒸馏水漂洗冰冻切片；
（2）醋酸铜饱和溶液漂染，置于37℃温箱中12～24小时；
（3）蒸馏水漂洗1次；
（4）Welgert氏碳酸锂苏木素液染色10～20分钟（染色不宜过深）；
（5）蒸馏水漂洗1次；
（6）Welgert氏硼砂—铁氰化钾液分化，以镜下见红细胞颜色不再呈现深蓝色为止；
（7）蒸馏水中充分漂洗3次（换水）；
（8）滤纸吸干切片周围水分，稍干；
（9）甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。
