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第32章 什么是组织分离法?如何进行?

组织分离法,也叫无性分离法,是利用灰树花子实体的组织 块,在适宜的培养基和生长条件下分离、培育纯菌丝的一种 简易方法。这种分离法操作容易,后代能保持原菌株的优良 性,不易发生变异。通常按以下步骤进行。

(1)种菇消毒。将优选的标准种菇置于接种箱内,用75%的 酒精棉球对种菇表面进行擦洗消毒,并用无菌纱布吸干,置 于消毒过的培养皿内备用。其种菇挑选、用具消毒同前。

(2)切块。把种菇撕开,在菌盖和菌柄交界处或菌管处,用 灭菌过的接种刀,切取一小块做接种块,然后将其纵切成若 干块的小薄片备用。为了减少带杂菌的机会,切取组织块时 尽量取小一些,以获得纯度高的菌种,而且小块容易成活。

(3)接种培养。用接种针挑取一小块接种块,小心地接入斜 面试管培养基的中央,置于25℃左右的培养室(箱)内培养 。接种时注意无菌操作,千万不可大意,经过3天的培养,当 组织接种块上长出白色的菌丝并向培养基上蔓延生长时,应 选择健壮、优良的菌丝体,进行提纯选育,另管培育成一代 母种。

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