（2）高温工作中缺乏适当劳动保护条件，产棉区长期食用未经处理的棉籽油。常见到睾丸萎缩、少精子、死精子或无精子症患者。
5）体外异种受精实验。常规精液分析的各项指标完全正常，有时也不一定能使精子具有受精能力。目前常用人精子穿透仓鼠卵子的异种受精实验验证男性不育者的实际生育能力。
精子穿透仓鼠卵试验是根据仓鼠卵去除透明带后，几乎不再具有种属特异性的特点而设计的，用人精子穿入仓鼠卵的百分率来评价精子的受精能力。
一般从4～12周龄的雌性仓鼠获取卵子，经处理放入含有一定数量已获能精子，在37℃温度中孵育3～5小时，然后吸出卵子在显微镜下观察。凡卵子卵浆内有肿大的精子、头并附有尾部者认为已受精，并且计数。
这种方法是诊断男性不育症一种很有实用价值的方法。
6）精子宫颈黏液穿透试验。
①玻片法：使精子与宫颈黏液直接接触，试验不能真实地反映客观情况，并难以标准化及定量。
②毛细管法：将黏液放入一端封闭的毛细管中，另一端直立浸在黏液中，观察精子群的活动能力。
精子穿透宫颈黏液能力与精子活动力的大小有关。宫颈黏液有筛选形态异常精子的能力，不合格的精子不能穿透宫颈黏液。如果精子在试验中穿透能力正常，常提示不孕是由女方宫颈黏液异常所致。
五、前列腺液检查
正常前列腺液为白色，呈微酸性，pH6.3～6.5。内含总脂28.0毫克/分升，其中磷脂占65％。白细胞数在10个以内，并可见到少许上皮细胞、淀粉样物体及精子。患前列腺炎时，镜检白细胞数增加，或见成堆的脓细胞，卵磷脂颗粒减少。
六、内分泌检查
目前常用的方法有：血浆睾酮水平测定；人体绒毛膜促性腺激素刺激试验；促性腺激素释放激素刺激试验。
克罗米芬是合成的女性激素衍生物，此药可诱发排卵和产生精子，临床常用于治疗少精子症。应用克罗米芬以后能增强丘脑下部促性腺激素释放激素的分泌，睾丸分泌睾酮也因而增加。所以克罗米芬刺激试验，是检查丘脑下部功能的良好办法。
试验需时12天，在服克罗米芬之前，先查两天血浆和黄体生成素的基础水平。从第三天开始连续服克罗米芬10天，用量为200毫克／日，一次或分次口服。在服药后第九、十两天测定血浆睾酮和黄体生成素的浓度。正常用此药10天后与对照值相比较，黄体生成素的增长幅度为72％～245％，卵泡刺激素为45％～130％，睾酮为40％～220％。从增长幅度可以看出，卵泡刺激素增长幅度不如黄体生成素及睾酮明显，因此阳性指标是以黄体生成素及睾酮的增长幅度为主。青春期前儿童的刺激试验反应为阴性时，提示青春期尚未开始，但不能预示是否开始发育。16岁时一般呈阳性反应，若年龄超过17岁，兴奋反应不明显，则应进行垂体功能检查。在青春期少年或青春期后成年，若克罗米芬刺激试验是阴性，那么，一般来说，年龄越大，则垂体功能低下的可能性越大。成年男性病人患单纯垂体性幼稚症，可以本试验阴性作为诊断参考。至于原发性睾丸功能低下病人，一般是黄体生成素值偏高，用药兴奋后不再上升。原发性无精子或精子稀少的病人，本试验呈阳性。
人体绒毛膜促性腺激素刺激试验。人体绒毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盘分泌的激素。HCG能促进男性胎儿的睾丸分泌少量睾酮，对男性胎儿的副性器官发育有意义。虽然在妊娠终末HCG已降至很低水平，但已成熟的睾丸已能分泌睾酮，足以使睾丸正常下降。HCG也能促进女性卵巢分泌雌激素和排卵，临床上常用此药治疗不育症。为男病人进行HCG刺激试验，可检查体内的睾丸组织是否具有分泌功能。检查结果如为阳性，表明体内睾丸组织有分泌功能。如检查结果反应偏低，应考虑为隐睾症或原发性睾丸功能低下。如为阴性反应，也不能立即做出相反的诊断。女性病人检查HCG的变化，目的在于诊断早期妊娠、葡萄胎及绒毛膜上皮癌等疾病。
促性腺激素释放激素刺激试验。在下丘脑的神经分泌物中，含有促性腺激素释放素（GnRH）。若GnRH神经元损伤或垂体功能低下时，睾酮的分泌会有明显减少。GnRH刺激试验的目的，在于检查垂体的功能。
血浆睾酮水平测定血浆中睾酮的浓度个体差异很大。正常壮年期男性（20～50岁）的水平最高，平均为570～7009微克％，50岁以后，其浓度逐渐减少。血浆睾酮的水平在昼夜间有差异，早晨8～10时最高，午夜2时最低。睾酮分泌过多，原因可为睾丸的良性间质细胞瘤，血浆睾酮比正常人多100倍，因而表现为肌肉和骨骼的生长过快，性器官过早发育和副性征过早出现。睾酮分泌不足，可见于因手术、感染、化学中毒、放射线损伤或发育不全等原因而致睾丸功能低下。也可能继发于垂体病变，因促性腺激素减少以致睾丸间质细胞发育不良。目前测定血浆中睾酮含量的方法很多。如放射免疫法，由于血浆用量较少，误差也少，有一定优越性。
七、睾丸活组织检查
男性能否生育首先检查睾丸组织是否受到过损害，生精功能是否正常。进行睾丸活组织检查，除诊断男性不育外，还可诊断睾丸其他疾病。睾丸活组织检查有两种方法。
（1）穿刺法。用针管及针头，抽吸少许睾丸组织。
（2）切开法。阴囊皮肤作2厘米左右的小切口，剪下一小块睾丸组织。
睾丸组织切片检查时可见，在正常情况下，青春期前曲细精管细小，无基底膜，仅有原始生殖细胞和支持细胞，间质细胞不明显。青春期后则表现为曲细精管直径加宽，有较薄的基底膜。上皮细胞能显示精子发育成熟的各个时期。精原细胞靠近基底膜，成熟的生殖细胞靠近白细胞管管腔，管腔内可有较多精子。睾丸的生殖病理变化，主要出现在曲细精管生精上皮和曲细精管基底膜。
男性不育症经睾丸活动组织检查，一般常见的病变如下：睾丸不成熟，其组织为青春期前的组织；精子发生低下，各时期精子都有，但数量减少；曲细精管变性，曲细精管透明变性或纤维化；克氏综合征，可见曲细精管细小，无生精细胞，唯有支持细胞的基底膜增厚，有时表现为透明；单纯支持细胞综合征，无各期生殖细胞，仅有支持细胞：成熟障碍或生精阻滞生精过程被阻止在初级精母细胞或精原细胞阶段；睾丸组织接近正常，不育的原因应考虑输精管道被阻塞。
总之，睾丸活组织检查，是确诊男性不育症的重要方法。
八、输精管、精囊造影常用于男性不育症的检查通过尿道或阴囊部注入造影剂，使射精管、精囊、输精管及附睾显影，以了解各部输送通道梗阻、炎症、结核、先天性畸形及其临近组织的有关病变。
常用的输精管、精囊造影方法有下述两种。
（1）经输精管法。切开阴囊外上部，显露输精管，用注射针刺入输精管注入造影剂1.5～5毫升。
（2）经尿道逆行插管法。先用尿道镜或膀胱镜插入尿道后，在精阜两旁找到射精管开口，将细导管插入1～3厘米，然后注入造影剂2～5毫升。
输精管、精囊造影对于诊断男性不育的原因有着重要意义，可以发现精子运输通道的先天性畸形、炎症、肿瘤等疾病，另外对前列腺病变的诊断也有一定的帮助。
九、多普勒超声检查
对可疑的精索静脉曲张及隐性精索静脉曲张患者，通过一般物理检查不易确诊时用多普勒超声仪检查能获得较为准确的结果。
十、免疫学检查
目前最常用的抗精子抗体测定技术有精子凝集试验、毛细血管内凝集试验、胎盘内凝集试验、补体依赖性精子制动试验以及抗体标记荧光免疫技术等。
精子凝集试验的血清精子凝集抗体滴度取1∶32作为有临床意义的低限标准。低于1∶32者生育力稍有减低。1∶64～1∶512为中滴度，可以生育，但生育力较低。1∶512以上为高滴度，表明被检者无生育力。精浆中的抗精子抗体滴度与血清中的滴度也不完全一致。精浆的精子凝集抗体滴度1∶16，生育力显著降低，但并不是不能生育；滴度高于1∶32，可能不育。这些滴度数值只适用于精子计数每毫升2000万以上的男性不育患者。
荧光免疫法检测，不管其他方法检测抗精子抗体是否阳性，它总是约有30％的患者出现阳性反应。所以，临床上价值不大。
混合抗球蛋白反应试验，此法特异性较强。测定抗精子抗体的准确性超过90％。由于操作技术简单，可作为一种筛选试验。
十一、染色体检查
染色体异常者一般生育功能都受到影响。如果一个不育患者的睾丸体积小于12毫升，或者两性畸形都应该检查染色体，因其染色体异常的可能性很大。另外，妻子有习惯性流产或畸胎史时，夫妻双方应做染色体鉴定。
染色体异常有两种情况：一种是染色体的数目异常；另一种是染色体的结构畸变。
在男性不育中，性染色体数异常引起的病症常见的是先天性曲细精管发育不全综合征，其典型核型是47XXY，还有47XXY／46XY嵌合型。在女性不育中，性染色体异常的疾病有性腺发育不全。而染色体结构畸变中，染色体易位是引起不育症的一个主要的原因。如果夫妇有一方是染色体平衡易位携带者，虽然他本身并无异常表现，但可能给后代带来染色体异常的危险性。这样的胚胎在妊娠早期流产的可能性很大，幸存者可能是染色体病患者。因而在妊娠20周左右应做产前诊断，通过羊水细胞培养鉴定胎儿染色体的结构和数目是否正常，异常时应及早做人工流产。
检查染色体一般是从患者静脉采血1.5毫升，鉴定核型和分辨染色体的数H和形态结构。染色体检查为遗传疾病以及某些其他疾病的病因、发病机制、诊断、预防以至预后等提供了科学依据。
交媾试验：交媾试验是检查精子是否能穿过宫颈的试验方法。
精子射进阴道后要穿过宫颈。宫颈黏液由宫颈腺体分泌。宫颈黏液的量和性质随月经周期中雌激素和孕激素水平出现周期性变化。在月经中期，宫颈黏液大且稀薄、拉丝长，使精子易穿过。如果精子活动能力差，或宫颈黏液少而黏稠，或存在抗精子抗体等，将会影响精子穿透宫颈黏液。
1.试验的时间
在月经周期中，宫颈黏液能够允许精子穿透的时间的长度每个妇女不同。同一个妇女的每个周期也有差异。应因人而异确定出进行精子穿透试验的最佳时间。可采用B超监测排卵来判断排卵日期。试验应该尽可能靠近排卵期进行，可以根据基础体温、宫颈黏液的变化和阴道细胞学检查来确定排卵时间。
每对夫妇在进行试验前应该至少禁欲2天。在同房前24小时内禁止阴道内用药或冲洗。上床前把大小便排尽，避免同房后几小时内上厕所。性交后仰卧，屈膝，垫高臀部休息至少30分钟，防止精液流出。试验应在性交后6～8小时进行，18～24小时进行也是可以的。
2.性交后试验技术
医生将没有涂抹滑润剂的阴道窥器插入阴道，用不带针头的注射器、吸管，分别吸取阴道后穹窿、宫颈外口和宫颈内口的宫颈黏液，高倍显微镜下观察精子情况。
（1）阴道后穹窿样本。由于阴道内酸性环境，精子在阴道内仅能存活2小时，检查阴道样本的目的在于证实精液确实进入阴道内。
（2）宫颈外口样本。宫颈外口精子数目随着性交后时间延长而减少。性交后2～3小时，在宫颈下段积聚大量的精子。在宫颈黏液中，根据精子移动情况可以分为4级：①迅速和直线向前运动；②缓慢直线或非直线运动；③非向前运动；④不活动精子。
一对正常夫妇性交后，在宫颈内样本通常用400倍视野可以观察到25个Ⅰ级和Ⅱ级活动精子，如果用高视野有10个以上Ⅰ级活动精子，即可以认为是良好的；如果仅有5个活动精子，并且为迟钝缓慢或转圈运动形式，则说明精液中精子数目少和活动率差，或者宫颈黏液异常。
性交后4小时开始，宫颈外口的精子数目逐渐减少。所以在4小时以上间隔时间检查，从宫颈下段收集到的宫颈黏液中仅可发现很少的精子。
（3）宫颈内口样本。在射精后，少数精子迅速到达宫颈内口，而且数目逐渐增多。在2～3小时后达到一个高峰。在24小时之内，精子数目相对稳定。
所以在性交后6～10小时，用高倍视野具有Ⅰ和Ⅱ级活动度的精子数目大多为10个，即属于正常范围。在性交后10～24小时，可检测到的精子数目与6～10小时相似。
3.试验结果
性交后试验的目的，不仅在于检查性交后数小时以后，在宫颈黏液中活动的精子数目，而且还要评价精子的活动状况。在性交后6～10小时宫颈内存在适当数量的活动精子，就可排除由宫颈因素引起的不育。
试验阴性不能轻易下结论，因为有可能选择的时间不当。有时由于性交后试验进行得太早或太晚，可以造成假阴性结果。如果不能利用准确可靠的时间来确定排卵时间，则有必要在一个周期中重复作几次性交后试验。
一旦证实性交后试验为阴性，可以进一步确定是精子质量问题，或是由于宫颈黏液的有害因素，并且可测定宫颈黏液中是否存在抗精子抗体。对于性交后试验阴性的不育夫妇，可以利用人工授精办法，帮助他们受孕。
